Naujausi per maistą plintančių ligų protrūkiai ir nauji Ligų kontrolės ir prevencijos centro arba CDC apskaičiavimai dėl per maistą plintančių ligų galėjo būti postūmis, paskatinęs neseniai priimti maisto saugos įstatymo projektą S.510. Pagal šiuos teisės aktus FDA turės sukurti naujas produktų saugos taisykles didžiausios rizikos vaisių ir daržovių gamintojams. Dėl padidėjusio saugaus maisto skubos jausmo maisto augintojai ir perdirbėjai iš naujo įvertina savo galimybes išbandyti maistą šaltinyje arba lauke.
ESAMOS BANDYMO TECHNOLOGIJOS
Augintojai ir perdirbėjai istoriškai naudojo vieną iš trijų bakterijų tyrimo metodų: adenozino trifosfato (ATP) švaros stebėjimo sistemas, kultūros tyrimus ir polimerazės grandininės reakcijos (PGR) tyrimus.
Adenozino trifosfato švarumo stebėjimo sistemos tikrina ATP molekulę, kuri yra visose organinėse medžiagose. ATP tyrimais matuojamas ATP iš gyvūnų ir augalų ląstelių, taip pat gyvų ar negyvų bakterijų, mielių ar pelėsių. Šis tyrimas gali būti naudojamas neorganiniams paviršiams švarumui nustatyti ir turi būti nuo 10,000 100,000 iki XNUMX XNUMX bakterijų, kad susidarytų pakankamai ATP, kad būtų galima nustatyti teigiamą bakterijų aptikimą.
Kultūros tyrimas yra laboratorinis tyrimas, kuriuo nustatoma, kokių bakterijų ar mielių gali būti tam tikrame mėginyje. Kultūros tyrimams reikia, kad mėginys būtų inkubuojamas nustatytą laiką, paprastai 24–48 valandas, kad bakterijos galėtų augti ir nustatyti jo buvimą. Tam reikia nusiųsti mėginį į laboratoriją.
PGR yra tyrimas, kurio metu DNR naudojamos įvairios bakterijos ir patogenai. Šis procesas sustiprina DNR gabalėlį, sukuriantį nuo tūkstančių iki milijonų kopijų. Tai labai tikslus ir trunka nuo 12 valandų iki 26 valandų.
Įgimtos problemos
Esamos technologijos turi trūkumų, dėl kurių jos neveiksmingos maisto gamintojų reikmėms, o neveiksmingi bandymai gali sukelti maisto užteršimą, ligas, pajamų praradimą ir dar daugiau.
ATP tyrimais tikrinama, ar nėra ATP molekulės, kurios yra visose organinėse medžiagose. Tai reiškia, kad teigiamas ATP testas tik patvirtina, kad yra organinių medžiagų – nebūtinai bakterijų. Šis tyrimas iš tikrųjų yra švarumo arba paviršiaus švarumo, gyvų ar negyvų organinių medžiagų, testas. Kadangi tikrinama dėl organinių medžiagų, jo negalima naudoti maistui, nes maistas yra ekologiškas. Be to, ATP tyrimas negali aptikti bioplėvelės, kuri yra lipnus šalutinis organizmų produktas, galintis paslėpti gyvas bakterijas. Kita problema, susijusi su ATP tyrimu, yra pagaminti pakankamai ATP, kad būtų gautas teigiamas testas, bakterijų skaičius turėtų būti bent 10,000 XNUMX bakterijų.
Kultūros tyrimai apskritai yra gana tikslūs, tačiau šis metodas reikalauja, kad bakterijos būtų inkubuojamos 24–48 valandas, kad būtų patikrinta, ar nėra bakterijų. Tai reiškia, kad mėginys siunčiamas į laboratoriją šiam inkubacijos laikui, o apmokytas technikas nuskaito testą. Laboratorinių darbų poreikis padidina galutinio vartotojo išlaidas, o papildomas laikas padidina tikimybę, kad užterštas maistas praslys per procesą.
PGR tyrimai, nors ir labai tikslūs, reikalauja, kad gamintojas mėginį išsiųstų į laboratoriją, kur apmokytas technikas naudoja brangią įrangą tyrimui apdoroti. Pats bandymas susideda iš kelių sudėtingų žingsnių, kurie padidina maisto gamintojui tenkančias išlaidas. PGR tyrimams reikalinga sodrinimo fazė, kuri trunka nuo 8 iki 20 valandų, o faktiniam tyrimui – nuo 1 valandos iki 4 valandų. Papildomi veiksmai ir laikas padidina išlaidas ir tikimybė, kad maisto užteršimas bus nepastebėtas.
FERMENTŲ TESTAVIMAS
Mikrobiologai tiria ir naudoja fermentus bakterijoms aptikti nuo šeštojo dešimtmečio pradžios. Aštuntajame ir devintajame dešimtmečiuose daugelis nustojo naudoti fermentų metodus ir perėjo prie antigenų / antikūnų arba nukleorūgščių amplifikacijos tyrimo (NAAT) technologijų. Tačiau nuo to laiko nuolatiniai fermentų tyrimai leido atrasti specifinius bakterinius fermentus, susijusius su daugybe skirtingų mikroorganizmų. Dėl šios informacijos buvo sukurti patentuoti substratai, kurie gali identifikuoti specifinius fermentus, kuriuos išskiria specifinės bakterijos, ir susieti su jais. Su šia nauja informacija buvo sukurti bandymai, skirti panaudoti patentuotus substratus, kurie hidrolizuojami fermento sukuria fluorescenciją, kurią galima nuskaityti fluorometru arba pridedant reagento, kad gautų reakcijos kolorimetriją.
Kitos diagnostinės sistemos turi rasti pačią bakterijų ląstelę, augindamos mėginį kultūrose arba replikuodami DNR, naudodamos PGR/NAAT sistemą. Šie metodai daugeliu atvejų užtruks ilgiau nei vieną dieną, kol bus gauti rezultatai nuo mėginio paėmimo, ir jiems reikia apmokytų laboratorijos technikų ir brangios įrangos. Naudojant fermentų aptikimo metodiką, bakterijos gali gaminti tūkstančius fermento molekulių, o tai padidina aptikimo tikimybę ir laiką daug greičiau nei bet kokie kiti aptikimo metodai.
BAKTERIJŲ FERMENTŲ APtikimo rinkiniai
Naudojant šią metodiką, bakterijų fermentų aptikimo rinkiniai, kurie tiekiami rankiniuose tamponų rinkiniuose arba skaitmeniniuose rankinio fluorometro rinkiniuose, gali būti naudojami lauke, norint patikrinti paviršius ir maistą, ar nėra visų organizmų, gramneigiamų bakterijų (Enterobacteriaceae). Bandymai patvirtina bakterijų buvimą arba nebuvimą, viršijantį normalų foninį lygį, o rezultatai atliekami vietoje per 20 minučių. Testus lengva atlikti, nereikia papildomos įrangos, taip pat aptinkamos bioplėvelėje besislepiančios bakterijos. Tikslumas yra didesnis nei 98 proc., jei vienoje bandymo juostelėje yra daugiau nei 1,000 organizmų, lyginant su tradiciniais metodais. Rinkiniai sukurti kaip atrankos priemonė ieškant „karštųjų taškų“, kuriuose yra nepriimtinas bakterinio užterštumo lygis. Kadangi jie yra nebrangūs, greiti ir lengvai naudojami, galima dažniau stebėti ir tikrinti.
NAUDA
Fermentinių bakterijų aptikimo tyrimai turi daug pranašumų, palyginti su standartiniais kultūros, ATP ir PGR tyrimais, įskaitant greitesnį, lengvesnį naudojimą, didesnį tikslumą, mažesnę kainą ir galimybę aptikti bioplėvelę. Fermentų tyrimai pateikia rezultatus vos per 20 minučių nuo mėginio iki rezultato, o rezultatus galima gauti lauke arba vietoje, nes mėginių nereikia siųsti į laboratoriją. Kultūros arba PGR tyrimams naudojama specializuota įranga ir apmokyti technikai, o tyrimams netaikoma, todėl jie yra veiksminga ir nebrangi atrankos priemonė maisto augintojams ir perdirbėjams.
IŠVADA
Dabartinė kultūra, ATP ir PGR tyrimai yra brangūs, lėti ir sudėtingi. Fermentų aptikimo naudojimas bakterijoms identifikuoti lauke yra tikslus, greitas ir nebrangus būdas patikrinti pavojingą bakterinio užterštumo lygį. Turėdami nebrangų atrankos įrankį, vartotojai gali dažniau atlikti testus, o tai žymiai padidina bakterinio užteršimo sėkmės rodiklį, kol jis nepateks į vartotoją.